案件试剂盒灵敏度
首先,我们先来看一下灵敏度的定义:
但其实这是一个很模糊的描述。
第一,不同的反应体积下的灵敏度是不相同的。同款试剂盒,10μL反应体系就会比25μL反应体系的灵敏度更高。例如:VerifilerPlus在25μL体系下的灵敏度为0.125ng,但在10μL体系下可以做到0.05ng左右。
第二,灵敏度的定义是需要基于一定的重复数量和检出概率上的。一般情况下,体外诊断试剂的LoD是指测量结果超过95%检出的最低样本量,即重复20次,有19次以上成功检出的最低样本量,偶发性的实验结果不能被采纳为LoD。
新海观点
因此,新海认为,一款STR试剂盒的灵敏度的验证需要基于一定的重复实验(20次)和成功概率。我们在描述灵敏度的指标时,应该增加对应的反应体系。比如,针对某STR试剂盒,使用25μL体系,进行20次重复实验,所有基因座完全检出的概率大于95%的最低样本量为0.125ng。所以该试剂盒在25μL反应体系的灵敏度为0.125ng。
最后,别忘记,验证灵敏度的标准DNA应事先进行定量。如果标准DNA浓度不准确,则灵敏度的指标也会不准确